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                技术支持

                莫瞎采样,测了非瘟,感染非瘟!

                发布时间:2019-09-03 15:10阅读次数: 分享到:


                随着国家允许猪场进行自检和出于防控需求,猪场对非瘟的检测需求急剧增加。但非瘟检测不同于以往的疾病检测和常规抗体监测,在样品采集方面有许多特殊要求。


                采样注意事项

                ? 采样之前必须牢记和强化生物安全细节,严防交叉污染:做到一头猪使用一套采样工具(手套、采血针、棉签试子等),在不同栏舍或栋舍之间采集时,要做到洗手、消毒、换衣、换鞋。

                ? 健康猪只的排查不建议用血样。必须使用时,建议使用尾根血拭子,不建议使用前腔静脉或耳静脉采血法,这样可以避免血液对环境的污染。


                ? 发病猪的确诊检测不建议剖检取样,采样取病死猪分泌物或血液即可。


                 
                采集方法


                01
                尾根血试子采样方法
                    
                尾根血拭子的采集方法就是尾根处用一次性采血针(一猪一针头)扎破浅表血管,用棉签试子沾取适量血样,一般要求将白色棉签头全部沾成红色即可。采集后棉签迅速放入封口袋或者事先准备好的离心管内,并尽快送检。如需保存,则建议冷冻保存。采血处要做严格的止血处理,杜绝血液滴到环境中造成污染。





                02
                鼻腔拭子采样方法

                    在自然感染情况下,病毒会最先在鼻腔和唾液中检测到,要比病毒在血液中出现的时间早3~4天。这为拔牙争取了黄金时间,可减小猪场损失。


                    鼻腔试子(可以使用人用的肛门拭子或阴道拭子):用生理盐水沾湿的长棉签(10cm左右),将棉签拭子轻轻插入猪鼻腔中转动进行采样,采样后将棉签插回采样管管中,密封冷藏运输。


                03
                口腔液采样方法

                ? 按采样头数准备足够数量的唾液采集袋和5mL离心管。

                ? 每个离心管中加入1mL唾液保护剂。

                ? 采样时间最好是在早上或下午喂料之前,此时猪的口腔内较干净。

                ? 撕开包装袋后注意不要污染包装袋。

                ? 待猪咀嚼唾液袋2分钟后,将唾液采集袋放入原包装袋中,挤出唾液。

                ? 将挤出的唾液倒入加有保护剂的离心管,编号待检。

                注:一头猪或者一个栏使用一个采集袋,防止交叉污染。



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                (视频转自樊福好老师)

                04
                环境样品采样方法

                    检测环境样品的意义非常重大,可以防患于未然,规避重大风险。但是环境中的病毒载量一般不高,多为物理性携带,所以需要大面积收集样品,提高检出率。可使用0.9%生理盐水打湿(以不滴水为宜)的无菌纱布,大面积擦拭采样位置。收集挤压后的液体,倒入离心管中,用封口胶密封冷藏送检。


                05
                饲料和水

                    对于饲料(全价料或饲料原料)和水的检测主要是为了监测饲料和水是否被污染。

                饲料采样方法:在饲料传送带上铺上10*10cm见方纱布,或在出料口悬挂10*10cm见方纱布,经过30~40min的接触,取下纱布,生理盐水5mL将纱布洗脱后,将液体转入2mL离心管。或取原料筛下的粉尘100克置于250mL生理盐水中浸泡60min,期间间隔10min搅拌一次,取上清液转入2mL离心管。

                水样采样方法:水源水样或者污水样品等液体用一次性无菌注射器抽取1~2mL,加入离心管中,静置稳定后,取上清进行检测。


                检测方法及频率

                ? 到政府指定非瘟检测机构进行检测。

                ? 检测方法推荐荧光定量PCR,核酸提取检验的准确性比核酸免提法高,不推荐使用胶体金试纸条(特异性低)。

                ? 高风险期可每3天采样检测一次,平常监测可1周一次。

                来源丨黄伟

                审核丨多婷

                编辑丨陈晗




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